由于单分子检测（Single Molecule Detection, SMD）特有的高灵敏度、高空间分辨率、高时间分辨率、高信号质量等特点，使其有望发现其他常规实验中难以发现的实验现象，因此成为了生物学、医学及药学等生命科学领域重要的科研工具。本文结合作者所在的北京大学医药卫生分析中心生物成像平台的工作经验，概述了单分子荧光检测技术的原理以及在生命科学中的应用，以期为相关科研技术人员提供参考。