基于超高效液相色谱-质谱法的检测系统性红斑狼疮患者体内甾醇代谢物的检测方法。通过混合酐法使用吡啶酸和2-甲基-6-硝基苯甲酐将每种类固醇转化为相应的吡啶甲酰衍生物。衍生化反应进行顺利，得到了相应的吡啶甲酰衍生物。吡啶甲酰衍生物的正电离-ESI质谱以[M + H]+的形式作为基峰出现。与未衍生化分子相比，吡啶甲酰衍生物在正LC-ESI-MS选定反应监测（MRM）中提供了5-10倍更高的ESI响应。使用吡啶甲酯、固相萃取和氘标记的内标，可以通过LC-ESI-MS-MRM同时测定人体血浆中这些类固醇的浓度。